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維生素液相色譜檢測
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液相色譜儀及其聯(lián)用技術(shù)（如UHPLC-MS/MS、2D-LC）在維生素分析領(lǐng)域占據(jù)核心地位，其應(yīng)用方案全面覆蓋食品、保健品、嬰幼兒配方奶粉及飼料等多種基質(zhì)中各類維生素的精準測定與質(zhì)量控制。具體而言，該技術(shù)能夠高效應(yīng)對不同維生素的物化特性差異：針對脂溶性維生素（如維生素A、D、E、K），采用反相UHPLC-MS/MS方法或依據(jù)新國標（如GB 5009.296-2023）的二維液相色譜（2D-LC）技術(shù)，有效克服基質(zhì)干擾，實現(xiàn)維生素D等難測成分的高靈敏度、高專屬性定量；針對水溶性維生素（如B族維生素、維生素C），則通過UHPLC-MS/MS或結(jié)合柱前在線衍生法（用于氨基酸類前體物質(zhì)）進行快速、同步檢測，確保結(jié)果的準確性與重現(xiàn)性。這些先進的液相色譜解決方案不僅為產(chǎn)品營養(yǎng)標簽的符合性、配方研發(fā)的科學(xué)性提供了關(guān)鍵數(shù)據(jù)支撐，同時也廣泛應(yīng)用于監(jiān)測飼料中維生素添加水平（如斑蝥黃）及排查非法添加物（如三聚氰胺），充分彰顯了該技術(shù)在保障營養(yǎng)安全、提升產(chǎn)品質(zhì)量和推動行業(yè)標準化進程中的不可或替代作用。
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維生素液相色譜檢測推薦
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依利特Agress 1100+ HPLC是在Agress 1100基礎(chǔ)上升級的高性價比型高效液相色譜系統(tǒng)。其優(yōu)化散熱與密封設(shè)計保障高強度穩(wěn)定運行和準確測試，前面板耐腐蝕處理增強溶劑適應(yīng)性。系統(tǒng)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，兼容正反相及GPC溶劑，支持溶劑置換，并可匹配Kromstation與Rubikstation工作站，符合數(shù)據(jù)可靠性要求，廣泛用于制藥、化工、環(huán)保等多個行業(yè)。
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EClassical3200L超高效液相色譜儀
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液相色譜儀配套
相關(guān)應(yīng)用
相關(guān)方案
通過UHPLC-MS/MS分析嬰兒配方奶粉中的水溶性維生素
作者：admin2025-09-05
簡介?水溶性維生素 (WSV) 主要由復(fù)合維生素 B 組成，是許多食品，尤其嬰兒配方奶粉的基本成分。這些維生素在代謝途徑中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，日常飲食攝入可以產(chǎn)生顯著健康獲益。?由于美國食品藥品監(jiān)督管理局 (FDA) 制定了這些維生素的每日營養(yǎng)推薦值，因此食品和補充劑生產(chǎn)商以及獨立檢測實驗室需要能夠定量鑒定該類產(chǎn)品中的維生素含量。在進行強化食品分析時，由于維生素濃度范圍較廣，與每日容許攝取量保持一致尤其具有挑戰(zhàn)性 (見表 1)。例如，在嬰兒牛奶中，維生素 B12 (氰鈷維生素) 的濃度為 1-2ppb，而維生素 B2 (核黃素) 的濃度則高達 1000 倍 (1-2 pm)。因此，任何定量分析方法都必須能夠適應(yīng)這種廣泛的濃度分布。我們提出了一種 LC-MS/MS 方法，一次進樣即可定量分析 B 族維生素。分析的維生素包括維生素 B1 (硫胺素)、B2 (核黃素)、B3 (煙酸)、B3*(煙酰胺)、B6 (吡哆醇)、B7 (生物素)、B9 (葉酸) 和維生素 B12 (氰鈷胺)，使用三個內(nèi)標。采用簡單的液液萃取法從嬰兒配方奶粉中提取維生素。樣品提取與快速分析方法 (<6 分鐘) 相結(jié)合具有穩(wěn)定性 / 可靠性，并且耗時最少。?實驗?硬件 / 軟件?液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜分離使用 EClassical3200L-MS2Vertical 9100 液相質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)，所有儀器控制、分析和數(shù)據(jù)處理均使用液質(zhì)軟件平臺執(zhí)行。?方法參數(shù)?LC 和 MS/MS 方法參數(shù)分別見表 2 和表 3。溶劑、標準品和樣品制備?使用的所有溶劑、試劑和稀釋劑均為 HPLC 級，并通過 0.22-um 尼龍針頭式過濾器過濾。?對于所有樣品的稀釋，使用 5-mM 甲酸銨，并用 10% 甲酸調(diào)整 pH 為 4.9。?所有 B 族維生素標準品，包括 B1 (硫胺素)、B2 (核黃素)、B3 (煙酸)、B3*(煙酰胺)、B6 (吡哆醇)、B7 (生物素)、B9 (葉酸) 和 B12 (氰鈷胺) 均從 Sigma-Aldrich Inc.,Saint-Louis,MO. 購買。?為了校準和定量，使用了三個內(nèi)標：維生素 B1"(硫胺素；?13C4?C8?H17? N4?OS+)、B7"(生物素；?C10?D2?H14? N2?O3? S) 和 B2'(核黃素；?13C4?C13?H2015? N2? N2?O6?))，全部來自 Sigma-Aldrich Inc.。校準 B3、B3*、B6 和 B1 時采用 B1'，校準 B7、B9 和 B12 時采用 B7，校準 B2 時采用 B2。?分析樣品包括兩種商購獲得的嬰兒配方奶粉，標記為 IF1 和 IF2。?表 3.MS/MS 參數(shù)為了防止可能的標準品或樣品不穩(wěn)定性，所有儲備和工作標準品均冷藏存儲，直到使用；所有制備樣品均在 4 小時內(nèi)進行分析，并且只使用琥珀色 2mL LC 小瓶。?所有標準品和樣品均通過 0.22-um 尼龍過濾器過濾。?實驗?標準品制備?在 250mL 容量瓶中制備 40ug/mL 的 B2、B9 和 B7 儲備標準品。由于這三種維生素在堿性條件下溶解最佳，所以首先在燒瓶中加入 50mL0.05% 氫氧化
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反相UHPLC-MS/MS分析保健食品中的脂溶性維生素
作者：admin2025-09-15
簡介維生素是人體內(nèi)各種代謝功能所必需的微量營養(yǎng)素。維生素可分為水溶性和脂溶性維生素。脂溶性維生素 (FSV) 主要由維生素 A、D、E 和 K 組成，儲存在肝臟和脂肪組織中，消除速率比水溶性維生素慢。因此，人體不需要經(jīng)常補充 FSV。FDA 建議人體 FSV 推薦攝入量 / 耐受量見表 1。由于脂溶性維生素的溶解度有限，食品、食品添加劑和補充劑中的 FSV 一般主要采用正相液相色譜法進行分析，在樣品制備和后續(xù)色譜分析中通常使用二氯甲烷作為主要有機溶劑。但是由于與所用溶劑有關(guān)的固有危害，以及較高處置成本，這種方法可能并不理想。當(dāng)使用反相液相色譜法 (RPLC) 時，將脂溶性維生素溶解到適當(dāng)溶劑中是一項挑戰(zhàn)。還必須考慮到任何額外的樣品步驟將增加分析時間。此外，通過 RPLC 分析脂溶性維生素時，由于二氯甲烷常被用作樣品稀釋劑，所以避免因溶劑效應(yīng)而導(dǎo)致的早期洗脫物出現(xiàn)色譜峰變形是一項重大挑戰(zhàn)?；谏鲜隹紤]，本文提出了分析物在 100% 二氯甲烷中溶解 / 稀釋并通過反相 UHPLC-MS/MS 分析 FSV 的一種方法。實驗溶劑和標準品使用的所有溶劑、試劑和稀釋劑均為 HPLC 級或更高。所有稀釋均使用 HPLC 級二氯甲烷。FSV 標準品，包括維生素 A 醋酸酯 (視黃醇醋酸酯)、D3 (膽鈣化醇)、D2 (麥角鈣化醇)、K2 (甲基萘醌)、E (生育酚)、E 醋酸酯 (生育酚醋酸酯)、K1 (葉洛醌) 和 A 棕櫚酸酯 (視黃醇棕櫚酸酯)，均從密蘇里州圣路易 Sigma-Aldrich Inc. 獲得。使用二氯甲烷制備 100μg/mL FSV 工作標準品。為了防止標準品不穩(wěn)定，所有儲備和工作標準品均冷藏 (4°C) 存儲，并且只使用 2mL 琥珀色 LC 小瓶。硬件 / 軟件色譜分離使用依利特科技 UHPLC 系統(tǒng)及依利特科技 MS2 Vertical 9100 液相質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)檢測器。所有儀器控制、分析和數(shù)據(jù)處理均使用軟件平臺進行。方法參數(shù)LC 和 MS/MS 方法參數(shù)分別見表 2、表 3、表 4。結(jié)果和討論如圖 1 所示，在不到 15 分鐘的時間內(nèi)實現(xiàn)了 8 種維生素良好色譜分離，如圖 2 所示，5 次重復(fù)檢測的重疊顯示了出色的色譜重現(xiàn)性。三組 10 次重復(fù)進樣使用二氯甲烷制備的 100μg/mL FSV 標準品，所有峰面積的 % RSD 均小于 3%(表 5)。這表明進樣之間擁有出色的重現(xiàn)性。結(jié)論通過減少 LC 進樣量和提高所使用色譜柱的內(nèi)徑，反相色譜法可直接應(yīng)用于二氯甲烷中制備的脂溶性維生素分析，并且不會因溶劑效應(yīng)導(dǎo)致的早期洗脫分析物色譜峰失真而造成色譜性能損失。獲得的面積 % RSD<3%，表明方法重現(xiàn)性出色。結(jié)果表明，該方法適用于脂溶性維生素的反相 UHPLC-MS/MS 分析。參考U.S. Food and Drug Administration (FDA), Guidance for Industry: A Food Labeling Guide (14. Appendix F
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食品行業(yè)維生素檢測 解決方案
作者：admin2025-09-23
目錄第 1 章 前言 11.1 HPLC 法測定維生素含量的標準 11.2 儀器配置簡表 2第 2 章 維生素 A 的含量測定 32.1 反相高效液相色譜法 32.2 正相高效液相色譜法 102.3 紫外分光光度計法 11第 3 章 維生素 D 的含量測定 133.1 反相高效液相色譜法 133.2 正相高效液相色譜法 19第 4 章 維生素 E 的含量測定 214.1 反相高效液相色譜法 214.2 正相高效液相色譜法 26第 5 章 維生素 B1 的測定 295.1 儀器設(shè)備與試劑 295.2 實驗方法 305.3 實驗結(jié)果 31第 6 章 維生素 B2 的測定 346.1 儀器設(shè)備與試劑 346.2 實驗方法 356.3 實驗結(jié)果 36第 7 章 維生素 B3 (煙酸) 的測定 397.1 儀器設(shè)備與試劑 397.2 實驗方法 407.3 實驗結(jié)果 41第 8 章 泛酸的測定 448.1 儀器設(shè)備與試劑 448.2 實驗方法 458.3 實驗結(jié)果 46第 9 章 維生素 B6 測定 499.1 儀器設(shè)備與試劑 499.2 實驗方法 509.3 實驗結(jié)果 51第 10 章 維生素 K1 的測定 5410.1 儀器設(shè)備與試劑 5410.2 實驗方法 55第 11 章 葉酸的測定 5611.1 儀器設(shè)備與試劑 5611.2 實驗方法 56第 12 章 維生素 B12 的測定 5712.1 儀器設(shè)備與試劑 5712.2 實驗方法 57附錄 1 維生素標準溶液校正方法 59第 1 章 前言維生素（英語：Vitamin）是一系列有機化合物的統(tǒng)稱。它們是生物體所需要的微量營養(yǎng)成分，而一般又無法由生物體自己生產(chǎn)，需要通過飲食等手段獲得。維生素不能像糖類、蛋白質(zhì)及脂肪那樣可以產(chǎn)生能量、組成細胞，但是它們對生物體的新陳代謝起調(diào)節(jié)作用。維生素是食品中重要的營養(yǎng)成分，缺乏維生素會導(dǎo)致嚴重的健康問題，適量攝取維生素可以保持身體健康，過量攝取維生素卻會導(dǎo)致中毒；因此食品中維生素含量的檢測至關(guān)重要。國家頒布多項標準法規(guī)，對食品、保健品、食品添加劑等中維生素含量檢測進行規(guī)范，以保障食品安全。依利特儀器參考國家標準及文獻，整理了食品中維生素檢測解決方案，供相關(guān)企業(yè)參考使用。1.1 HPLC 法測定維生素含量的標準第 2 章 維生素 A 的含量測定2.1 反相高效液相色譜法本節(jié)反相高效液相色譜法對維生素 A 進行檢測是參考 GB 5009.82-2016《食品安全國家標準 食品中維生素 A、D、E 的測定》，適用于需要參照 GB 5009.82-2016 對食品中維生素 A 進行檢測的用戶參考使用。2.1.1 儀器設(shè)備與試劑實驗過程中其它玻璃器皿還包括棕色容量瓶 (10mL、50mL)、1.5mL 塑料離心管、移液槍 (0~1000μL，0~5000μL)、移液槍槍頭 (1mL，5mL)、一次性注射器 (1mL)、針筒式濾膜 (0.45μm)、進樣針、一次性 PVC 手套、一次性口罩等。2.1.2 實驗方法標準溶液配制維生素 A 標準儲備溶液 (0.500mg/mL)：準確稱取 25.0mg 維生素 A 標準品，用無水乙醇溶解后，轉(zhuǎn)移入 50mL 容量瓶中，定容至刻度，此溶液濃度約為 0.500mg/
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二維系統(tǒng)測定維生素D方案
作者：admin2025-09-24
前言維生素 D（簡稱 VD）是一種脂溶性維生素，最主要的成分是維生素 D3與 D2。前者由人皮下的 7-脫氫膽固醇經(jīng)紫外線照射而成；后者由植物或酵母中含有的麥角固醇經(jīng)紫外線照射而成。維生素 D 的主要功用是促進小腸粘膜細胞對鈣和磷的吸收，腸中鈣離子吸收需要一種鈣結(jié)合蛋白，1，25-二羥基維生素 D3可誘導(dǎo)此蛋白合成，促進 Ca2+吸收，又可促進鈣鹽的更新及新骨生成，也促進磷吸收與腎小管細胞對鈣、磷的重吸收，故可提高血鈣、血磷濃度，有利于新骨生成和鈣化。維生素 D 還有促進皮膚細胞生長、分化及調(diào)節(jié)免疫功能作用。一般成年人經(jīng)常接觸日光不致發(fā)生缺乏病，嬰幼兒、孕婦、乳母及不常到戶外活動的老人要增加維生素 D 供給量到每日 10μg（相當(dāng)于 400 國際單位）。缺乏維生素 D 兒童可患佝僂病，成人患骨質(zhì)軟化癥。二維液相色譜二維液相色譜是將分離機理不同而又相互獨立的兩支色譜柱組合，加強分離能力的聯(lián)用技術(shù)。二維液相色譜系統(tǒng)通常由第一維分離柱和第二維分離柱串聯(lián)而成，兩柱之間以閥切換作為接口，通過流動相流路的改變，將部分或全部第一維柱流出的組分，導(dǎo)入第二維進行二次分離，從而起到凈化目標化合物，提高系統(tǒng)分離能力的作用。在一維分離系統(tǒng)中不能完全分離的組分，可能在二維系統(tǒng)中得到更好的分離，分離能力、分辨率可得到極大的提高。二維液相色譜可應(yīng)用于制藥、生物制藥、天然產(chǎn)物的研究和食品分析等領(lǐng)域中復(fù)雜樣品的分離分析，有著廣闊的應(yīng)用前景。本次依利特公司根據(jù)《GB 5009.296-2023 食品安全國家標準 食品中維生素 D 的測定》，用在線柱切換-反相液相色譜法（二維液相色譜法），提出了測定維生素 D 的解決方案，供大家參考使用。2、實驗方法2.1 樣品溶液配制維生素D_2標準儲備溶液 1mg/mL：準確稱取 50mg 維生素D_2標準品于燒杯中，用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至 50mL 容量瓶中，定容至刻度，混勻。維生素D_3標準儲備溶液 1mg/mL：準確稱取 50mg 維生素D_3標準品于燒杯中，用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至 50mL 容量瓶中，定容至刻度，混勻。維生素D_2、D_3混合標準溶液 50μg/mL：分別吸取維生素D_2標準儲備溶液 1mg/mL、維生素D_3標準儲備溶液 1mg/mL 各 5.00mL 于 100mL 棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度，混勻。2.2 色譜條件色譜柱：一維色譜柱：Supersil C8 3μm，120?，ID4.6×150mm二維色譜柱：SinoPak C18 3μm，120?，ID4.6×150mm富集柱：Supersil ODS2 5μm，300?，ID4.6×10mm檢測波長：264nm柱溫：室溫一維系統(tǒng)流量：1.0 mL/min進樣體積：100μL流動相組成 (V/V)：A: 水；B: 乙腈 / 甲醇 = 3/1梯度表：二維系統(tǒng)流量：1.0 mL/min流動相組成 (V/V)：乙腈 / 水
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