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一張圖譜，一次誤判，實驗重來——空白出峰到底是誰在搗鬼？

在高效液相色譜（HPLC）或液質聯(lián)用（LCMS）分析中，你是否也曾遇到這樣的困擾：明明進的是空白樣品，卻出現(xiàn)了不應該存在的色譜峰？

雙酚A檢測時，空白出峰

這些“幽靈峰”不僅干擾定性判斷，還會導致定量結果偏差，甚至讓整個實驗推倒重來。別急，系統(tǒng)化的排查從清晰分類開始。

一、空白出峰，問題出在哪？

空白出峰的來源復雜，可能隱藏于實驗的各個環(huán)節(jié)。在沒有明確分類的情況下盲目排查，往往事倍功半。因此，第一步必須明確你面對的是哪一種“空白”。根據(jù)污染來源的不同，我們通常將空白分為四類:

1. 溶劑空白

僅使用流動相或相應純?nèi)軇?，?jīng)樣品瓶和進樣針進樣。用于排除樣品基質本身的影響。

2. 系統(tǒng)空白（空針）

不進樣，僅啟動泵和檢測器，讓流動相走完全部分析流程。用于排查儀器流路、色譜柱或檢測器本身是否存在污染或殘留。

3. 樣品瓶與進樣針空白

用純?nèi)軇┏浞譀_洗樣品瓶和進樣針后，裝入該溶劑進樣分析。專門用于判斷污染是否來自進樣容器或進樣工具。

4. 前處理空白

模擬完整的樣品前處理步驟（如提取、凈化、濃縮），但不加入實際樣品。用于鎖定污染是否源自前處理試劑、耗材或操作過程。

二、記錄峰特征，捕捉“幽靈”線索

確定空白類型后，不要急于沖洗或更換部件。詳細記錄異常峰的特征，能為后續(xù)溯源提供關鍵線索：

關鍵參數(shù)：

- 保留時間（Rt）： 是否與目標化合物一致？

- 峰面積/峰高： 判斷污染程度。

- 峰形： 對稱、拖尾還是前沿？是否與目標峰共流出？

- 重現(xiàn)性： 連續(xù)進樣是否穩(wěn)定出現(xiàn)？

特殊特征（針對不同檢測器）：

- LCMS： 記錄質荷比（m/z）和碎片離子，區(qū)分背景噪音與真實污染物。

- DAD： 查看紫外光譜圖，判斷是溶劑吸收峰還是雜質峰。

總結：精準定位是成功的一半

面對空白出峰，冷靜分類，詳細記錄是高效解決問題的起點。明確污染來自系統(tǒng)內(nèi)部還是外部，能將排查范圍縮小一半，避免在錯誤的方向上浪費寶貴時間。

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